El cultivo in vitro es esencial en biotecnología para aplicar metodologías de mejoramiento genético en la caña de azúcar. La eficacia de estas técnicas depende del genotipo, lo que resalta la necesidad de identificar genotipos con alta competencia in vitro. La inducción de callos embriogénicos es un desafío, y aunque el 2,4-D es el inductor más empleado en caña de azúcar, el picloram es una alternativa en ciertos genotipos. El objetivo de este estudio fue optimizar protocolos de cultivo in vitro para variedades del Programa de Mejoramiento Genético de Caña de azúcar (PMGCA) del INTA, evaluando la eficacia de 2,4-D y picloram en la inducción de callos embriogénicos y regeneración de plantas. El ensayo se llevó a cabo utilizando como material vegetal tres cultivares de caña de azúcar desarrollados por el PMGCA, INTA 03-663, INTA 01-1505 e INTA 03-617, dos clones avanzados, INTA 08-900 e INTA 98-108, y un control INTA CP98-828. Se evaluaron dos protocolos de inducción de callos embriogénicos con 2,4-D y dos protocolos con picloram para la inducción de callos en genotipos recalcitrantes. La regeneración de las plantas se indujo bajo condiciones de fotoperiodo, y las plantas regeneradas fueron aclimatadas en un invernadero. En el ensayo de dos protocolos de 2,4-D, todos los genotipos evaluados mostraron una alta capacidad de establecimiento (>90 %) con formación de callos en una semana. Tras ocho semanas, cuatro de los genotipos presentaron una alta supervivencia de callos (>80 %). En cuanto a la capacidad embriogénica, dos genotipos, INTA 03-617 e INTA 98-108, destacaron por su capacidad de formar embriones somáticos (>80 %) y su alta proporción en el callo (50-100 %). Estos genotipos también mostraron alta regeneración de plantas (16-20 plantas/callo), comparable al material de referencia (22 plantas/callo), con una aclimatación superior al 90 %. INTA 03-663 y INTA 08-900 resultaron recalcitrantes e INTA 01-1505 de baja regeneración con 2,4-D. En el experimento utilizando dos protocolos con picloram con los tres genotipos recalcitrantes, más del 90 % de los explantes de INTA 03-663 e INTA 08-900 respondieron a ambos protocolos tras una semana de cultivo, mientras que INTA 01-1505 tuvo una inducción del 50 % de los explantes con ambos protocolos. Después de ocho semanas, más del 90 % de los callos de INTA 08-900 e INTA 03-663 sobrevivieron con los dos protocolos. El 60 % de los callos de INTA 01-1505 sobrevivieron a la mayor concentración de picloram, mientras que a baja concentración presentaron una baja sobrevivencia (<20 %). En cuanto a la capacidad embriogénica, INTA 08-900 respondió a ambos protocolos, con mejores resultados que con 2,4-D. INTA 01-1505 solo formó embriones con mayores concentraciones de picloram, mientras que INTA 03-663 no generó callo embriogénico. Los callos embriogénicos de INTA 08-900 e INTA 01-1505 regeneraron alrededor de 7 plantas/callo, logrando un aumento en la regeneración de INTA 08-900 respecto al 2,4-D. Se identificaron genotipos con alta competencia in vitro utilizando 2,4-D. El 20 picloram demostró su eficacia en generar callos embriogénicos y mejorar laregeneración de plantas en INTA 08-900.

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