Microscopía confocal: Análisis de callosa y dispersión de líquidos en hojas
Instituto de Fisiología y Recursos Genéticos Vegetales “Ing. Agr. Victorio Segundo Trippi” (IFRGV) – Área Fisiología Vegetal
Cuantificación de depósitos de calosa y permeabilidad de plasmodesmos en tejidos vegetales y determinación de dispersión y persistencia de adyuvantes.
Problemas o necesidades que resuelve
Se ofrecen dos servicios técnicos especializados que apuntan a resolver diversas problemáticas mediante técnicas asociadas a microscopía: 1) La deposición de callosa en plasmodesmos (Pd) y vasos de floema regula la difusión de moléculas entre células y como defensa contra la invasión de patógenos, que se ha observado en muchas especies vegetales. Es una respuesta primaria de defensa que se ha visto correlacionada con el nivel de resistencia de las plantas al ataque de patógenos, especialmente fúngicos. La tinción de este polisacárido se ha convertido en una valiosa herramienta para evaluar la permeabilidad de Pd asociada a diferentes condiciones fisiológicas, el cual es un carácter factible de ser utilizado en programas de mejoramiento. 2) Por otro lado, en la aplicación de agroquímicos, los adjuvantes son esenciales para la persistencia y absorción por lo cual la determinación de su dispersión y persistencia en las láminas foliares es una característica critica para el desarrollo y uso de productos de uso agrícola.
Propuesta
En primer lugar, se oferta la detección y análisis de la acumulación de calosa en plasmodesmos (Pd) y vasos de floema por tinciones con azul de anilina. La tinción de este polisacárido se ha convertido en una valiosa herramienta para monitorear la permeabilidad de Pd asociada a diferentes condiciones fisiológicas. En segundo lugar, se oferta la evaluación de la capacidad de dispersión y persistencia de adyuvantes foliares mediante tinciones con fluoresceína. En el desarrollo de soluciones adyuvantes o inóculos de aplicación superficial para vegetales de cultivo, es vital evaluar su capacidad de dispersión y persistencia sobre el organismo vegetal, luego de su aplicación. Las propiedades que un producto pueda tener para el crecimiento de un cultivo no se podrán explotar al máximo si éste es fácilmente lavado por lluvias o si se evapora rápidamente con altas temperaturas. Esta técnica presenta una opción rápida y confiable de visualizar y cuantificar la capacidad de dispersión y penetración de un producto (especialmente adyuvantes) versus agua pura, en tejidos de lámina foliar.
Ventajas
- Aplica a muestras vegetales de diverso origen. 2. Puede aplicarse a cultivos y plantas modelo. 3. Posible parámetro para la evaluación de valor agregado en origen.
Estado de Avance de la Tecnología
La tecnología se encuentra en una fase de aplicación operativa. El protocolo de tinción azul de anilina se encuentra puesto a punto para muestras de hojas de plantas de maíz sanas y enfermas con el mal de Río Cuarto (MRCV). Puede ajustarse para otras especies y condiciones. El protocolo para la evaluación de adyuvantes ha sido ajustado en folíolos de plantines de soja con cuatro compuestos diferentes. Resta realizar su validación en otros sistemas para su posible patentación.
Mercado Potencial
La evaluación de callosa está ajustada para maíz, los adyuvantes están ajustados para soja, pero puede ser ajustado para otras especies.
Fluoresceína de sodio; Adyuvantes; Agroquímicos; Dispersión superficial; Penetración tisular; Calosa, Fluorescencia; Microscopía confocal; Análisis de imágenes; patógenos; defensa; permeabilidad de plasmodesmos; infecciones virales
Eliana López Colomba, [email protected], Dirección IFRGV, Córdoba, Coordinación Nacional Asistente de Vinculación Tecnológica, Buenos Aires - Argentina